小鼠骨髓间充质干细胞是一种除造血干细胞以外的、具有多向分化潜能的干细胞,可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化,因此可以作为组织工程中的种子细胞。
目前常用的分离方法有全骨髓法和密度梯度离心法,全骨髓法即根据干细胞贴壁特性,定期换液除去不贴壁细胞,从而达到纯化MSC的目的;密度梯度离心法即根据骨髓中细胞成分比重的不同,提取单核细胞进行贴壁培养。
随着对表面抗原认识的深入,有人利用免疫方法如流式细胞仪法、免疫磁珠法等对其进行分离纯化,但经过流式或磁珠分选后的细胞出现了增殖缓慢等一些问题,加之耗费较大和技术的难度,在某种程度上限制了这些方法的广泛应用。
培养的意义
1.有利于进行骨髓间充质干细胞的生物学特性的研究。
2.为下一步的传代培养创造条件。
3.可以直接应用与临床实践,是研究小鼠骨髓间充质干细胞作用的前提。
此法的优点是:
①分离效果好,可一次获得较纯颗粒;
②适应范围广,能像差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒,又能分离有一定浮力密度差的颗粒;
③颗粒不会挤压变形,能保持颗粒活性,并防止已形成的区带由于对流而引起混合。